該載體系統(tǒng)設(shè)計用于在小鼠模型中，高效分析哺乳動物增強子。通常情況下，將感興趣的增強子克隆到該載體中，并將構(gòu)建好的載體用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠。對轉(zhuǎn)基因胚胎或成年小鼠中LacZ報告基因的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，可以進(jìn)一步分析增強子的活性。

該載體系統(tǒng)可用于篩選增強子元件，分析增強子的組織特異性，比較不同增強子的活性，譜系追蹤以及其他應(yīng)用。

關(guān)于該載體系統(tǒng)的更多信息，請參考一下文獻(xiàn)。

我們的載體系統(tǒng)是基于常規(guī)質(zhì)?；虮磉_(dá)載體而構(gòu)建的。待測增強子位于Hsp68最小啟動子（Hsp68_mini）的上游，可控制下游LacZ報道基因的表達(dá)。有活性的增強子會促進(jìn)最小啟動子增強LacZ基因的表達(dá)；在缺乏活性增強子的情況下，Hsp68_mini具有非常弱的本底表達(dá)能力，會使LacZ基因弱表達(dá)或不表達(dá)。在胚胎或組織切片中，通過X-gal與LacZ的顯色作用可以高度靈敏地原位檢測增強子活性。

易于制備轉(zhuǎn)基因動物：通過常規(guī)原核注射，可以很容易地高效制備轉(zhuǎn)基因胚胎或活體小鼠。

簡單而靈敏：使用LacZ作為報告基因，X-gal染色會產(chǎn)生明顯的藍(lán)色，即使在低表達(dá)水平下也可以輕松檢測到，因此可以非常靈敏地判斷增強子活性。

隨機(jī)整合：當(dāng)通過原核注射將載體用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠時，載體會以一個或多個拷貝的方式隨機(jī)整合到宿主基因組中。整合位點相鄰的基因組序列以及拷貝數(shù)和整合片段的不確定性，會影響報告基因的表達(dá)水平和特異性。為了克服這一點，對于給定的載體通常需要制備多個轉(zhuǎn)基因品系，以便鑒定多個品系的LacZ表達(dá)情況，進(jìn)而確定增強子的真實活性。

Enhancer: Your enhancer of interest is placed here.

Hsp68 minimal promoter: The minimal promoter sequence from mouse Hsp68 (heat shock protein 68kDa). This will drive transcription of the reporter if an enhancer element is present to activate it. In the absence of such enhancer activity, the minimal promoter will be almost completely inactive.

LacZ: The beta-galactosidase reporter gene. The encoded enzyme converts the colorless and soluble X-gal to an intensely blue insoluble product that stains the cells in which LacZ is expressed.

SV40 early pA: Simian virus 40 early polyadenylation signal. It facilitates transcriptional termination of the upstream ORF.

Ampicillin: Ampicillin resistance gene. It allows the plasmid to be maintained by ampicillin selection in E. coli.

pUC ori: pUC origin of replication. Plasmids carrying this origin exist in high copy numbers in E. coli.